immunoelectrophoresis käytetään monoklonaalisten vasta-aineiden laboratoriodiagnostiikkaan potilaan veressä. Monoklonaaliset vasta-aineet ovat peräisin samasta solusta ja ne on suunnattu samoja antigeenejä vastaan. Tästä syystä niitä on arvioitava patologisiksi ja, jos todistetaan, ne puhuvat Waldenströmin taudin kaltaisille sairauksille.
Mikä on immunoelektroforeesi?
Immunoelektroforeesia käytetään monoklonaalisten vasta-aineiden laboratoriodiagnoosissa potilaan veressä.Ioneilla on erilainen liikkuvuus. Tämä erilainen liikkuvuus muodostaa perustan elektrofreesimenetelmälle. Nämä menetelmät erottavat eri aineet toisistaan sähkökenttiä ja painovoimaa käyttämällä. Alan hyvin tunnettu menetelmä on immunoelektroforeesi.
Tämä on kvalitatiivinen diagnoosimenetelmä, jota käytetään monoklonaalisten vasta-aineiden havaitsemiseen. Vasta-aineet ovat immunologisesti aktiivisia proteiiniaineita tietystä solulinjasta. Monoklonaaliset vasta-aineet perustuvat kaikki samoihin B-lymfosyytteihin ja ovat siten suunnattuja yhtä epitooppia vastaan. Jokainen luonnollinen immuunivaste tunkeutuviin antigeeneihin vastaa polyklonaalista vastetta ja on siksi suunnattu eri epitooppeja vastaan. Siksi monoklonaalinen immuunivaste antaa viitteitä kehon patologisista prosesseista.
Monoklonaaliset vasta-aineet sitovat erilaisia molekyylejä erittäin spesifisesti. Tämä sitoutuminen voidaan osoittaa immunoelektroforeesin avulla. Menetelmä on laadullinen menetelmä laboratoriodiagnostiikassa ja koostuu kahdesta menetelmämenetelmästä, seerumin elektroforeesista ja immunodiffuusiosta.
Toiminta, vaikutus ja tavoitteet
Immunoelektroforeesissa yhdistyvät seerumin elektroforeesimenetelmät immunodifuusioon. Potilaan seerumi asetetaan agaroosigeelille tai selluloosa-asetaattikalvolle. Käytetään myös kontrolliseerumia. Levitystä seuraa näytteiden elektroforeettinen erottaminen. Antiseerumit, IgG, IgA, IgM, etikkahappo normaaliin elektroforeesiin ja kappa ja lambda levitetään jakoviivojen väliin.
Tämä luo reaktion potilaan seerumin vasta-aineiden kanssa, mikä luo saostumislinjoja. Käytetyn antiseerumin ja yksittäisten viivojen sijainnin ja muodon mukaan voidaan tehdä johtopäätöksiä kappa- tai lambda-kevytketjujen sisältämistä immunoglobuliineista. Lambda-vyöhykkeen tapauksessa on vapaita kevyitä ketjuja, jotka koostuvat vasta-aineista. Laboratorio tarjoaa lisätodisteita harvinaisten IgE: n ja IgD: n kautta, mikä mahdollistaa immunoglobuliinien tarkan määrittämisen. Immunodifuusioelektroforeesimenetelmä tapahtuu Pierre Grabarin ja Curtis Williamsin mukaan ja vastaa proteiinien agaroosigeelielektroforeesin ja vasta-ainediffuusion yhdistelmää.
Ensin tapahtuu agaroosigeelielektroforeesi. Myöhemmin sisältävät vasta-aineet diffundoituvat antigeenien nauhoja vastaan ja luovat siten saostumakaareja. Tämä on erotettava Laurellin mukaan rakettien immunoelektroforeesista, joka vastaa agaroosigeelissä olevien proteiinien elektroforeesia, joissa jokaisessa on vasta-aineita tietyssä konsentraatiossa. Geelissä on hieman emäksinen puskuri, joka antaa antigeenien vain siirtyä ja joka työntää suurimman osan vasta-aineita isoelektriseen pisteeseen altistamalla heikosti emäksiselle pH-arvolle, kunnes ne lakkaavat liikkumasta elektroforeettisesti.
Raketin immunoelektroforeesin alussa on ylimäärä antigeeniä, niin että muodostuu liukoisia antigeeni-vasta-ainekomplekseja. Elektroforeesin aikana antigeenejä ja muita vasta-aineita on myös sitoutumassa. Tällä tavalla ekvivalenssipisteeseen muodostuu immunosaosteita, jotka muistuttavat rakettimaisia kuvioita korkeudella, joka on verrannollinen antigeenipitoisuuteen. Sakan korkeus mitataan testin arvioimiseksi.
Löydät lääkkeesi täältä
➔ Lääkkeet puolustus- ja immuunijärjestelmän vahvistamiseksiRiskit, sivuvaikutukset ja vaarat
Monoklonaalisten vasta-aineiden havaitseminen on erityisen tärkeää multippelin myelooman ja Waldenströmin taudin diagnosoinnissa. Toimitetut todisteet puhuvat immuunisolujen pahanlaatuisesta rappeutumisesta. Multippeli myelooma vastaa luuytimen syöpää, jolle on tunnusomaista vasta-aineita tuottavien solujen pahanlaatuinen lisääntyminen plasmassa.
Nämä plasmasolut tuottavat vasta-aineita ja niiden fragmentteja. Pahanlaatuiset plasmasolut ovat aina peräisin yhteisestä esiastesolusta ja ovat siksi geneettisesti identtisiä. Ne tuottavat vain monoklonaalisia vasta-aineita. Tämän taudin pahanlaatuisuus voi vastata varhaisvaiheen vaiheita, mutta se voi myös saavuttaa erittäin pahanlaatuisen vaiheen, joka ilman hoitoa johtaa nopeasti kuolemaan. Taudin oireet johtuvat solujen pahanlaatuisesta kasvusta tai vasta-aineista ja vasta-ainefragmentteista. Yleisimpiä oireita ovat luukipu, luun liukeneminen ja spontaanit murtumat.
Veren kalsiumtaso nousee usein. Lisäksi epänormaalit vasta-aineet laskeutuvat usein kudokseen ja aiheuttavat toiminnallisia häiriöitä elimissä, mikä voi johtaa oireisiin, kuten munuaisten vajaatoiminta tai heikentynyt verenvirtaus. Waldströmin tauti on myös pahanlaatuinen tuumoritauti. Tarkemmin sanottuna se on pahanlaatuinen lymfoomatauti, joka lasketaan hitaasti etenevien ja melkein oireettomien B-solujen ei-Hodgkin-lymfoomien joukkoon. Useimmissa tapauksissa taudissa voidaan havaita monoklonaalisen IgM: n epänormaali tuotanto pahanlaatuisten lymfoomasolujen aktiivisuudesta johtuen.
Waldenströmin tauti on ominaisuuksiltaan erittäin samanlainen kuin multippeli myelooma, mutta sen suunta on yleensä suotuisampi. Suurin osa Waldenströmin tautia sairastavista potilaista on suurelta osin oireeton diagnoosiin mennessä. Muilla potilailla esiintyy varhaisessa vaiheessa oireita, kuten epäspesifinen väsymys tai perifeeriset neuropaatiat, jotka johtuvat monoklonaalisen IgM: n kerrostumisesta myeliinikuoreen. Jopa pienet määrät IgM: tä voivat laukaista polyneuropatian. Muilla potilailla ei esiinny polyneuropatiaa, jopa korkeilla tasoilla. Lisäksi voi esiintyä epäspesifisiä oireita, kuten kuume, ei-toivottu painonpudotus tai yöhikoilu. Luukipu on myös ominaista.
IgM: n ylituotannon vuoksi verestä tulee hyperviskoosia, joten mainitut oireet voidaan yhdistää hyperviskositeetin oireyhtymän oireisiin. Useimmiten tämä taipumus verenvuotoon ilmenee usein nenäverenvuotoina, päänsärkyinä, yleisen pahoinvoinnin tai näön hämärtymisenä ja akustisina valituksina. Tämän tyyppisten pahanlaatuisten sairauksien havaitsemiseksi immunoelektroforeesistä on pitkään tullut tavanomainen diagnoosimenetelmä.