ELISA

Niistä ELISA-testi on lääketieteellinen laboratoriotutkimus, joka johtaa ns. antigeeni-vasta-ainereaktioon. Erilaisia ​​antigeenejä, joilla on merkitystä ihmis- tai eläinlääketieteessä, voidaan testata. Saksassa testin suorittamisesta on valtuutettu vain akkreditoidut laboratoriolaitokset.

Mikä on menettely?

ELISA-testi on yksi ns. Immunologisista menetelmistä lääketieteellisissä laboratoriokokeissa. Testimenetelmää voidaan käyttää proteiinimolekyylien havaitsemiseen monissa erilaisissa kehon nesteissä.

ELISA on lyhenne sanasta Entsyymisidonnainen immunosorbenttimääritys. Siksi se on englanninkielinen nimi, mutta se on vakiintunut saksan lääketieteelliseen käyttöön.

ELISA-testi on yksi ns. Immunologisista menetelmistä lääketieteellisissä laboratoriokokeissa. Testimenetelmää voidaan käyttää proteiinimolekyylien havaitsemiseen monissa erilaisissa kehon nesteissä. Näiden molekyylien havaitseminen puolestaan ​​mahdollistaa johtopäätösten tekemisen tietyistä sairauksista tai kliinisistä kuvista, minkä vuoksi lääkärit tekevät diagnoosinsa myös riippuvaiseksi tällaisen ELISA-testin tuloksesta. Testausmenetelmä on siksi erittäin tärkeä päivittäisessä kliinisessä käytännössä, avohoidossa tai avohoidossa.

Vastaavat kehon nesteet, esimerkiksi kokoveri tai nivelten nesteet, lähetetään suoraan laboratorioon potilaan ottamisen jälkeen. Näytteet ovat yleensä erittäin kiireellisiä, koska alkuperäismateriaalia pidetään herkkänä ja se tulisi tutkia mahdollisimman pian. Ns. Päällekkäiset näytteet voivat johtaa vääriin negatiivisiin tuloksiin, koska havaittavat patologiset proteiinit ovat välin vähentyneet tai kokonaan hajonneet. Niin kutsutulla esianalyysillä on tärkeä rooli ELISAssa; epäilyttävät tai negatiiviset tulokset tulisi toistaa uudelleen, jos kliinisiä oireita esiintyy.

Toiminta, vaikutus ja tavoitteet

Koeputket ja ns. Mikrotiitterilevyt ovat välttämättömiä oikeassa testauksessa akkreditoidussa lääketieteellisessä laboratoriossa. Nämä levyt, joissa on hienot, puoliksi koverat sisennykset, on valmistettu erikoismuovista ja kukin päällystetty hyvin spesifisellä vasta-aineella.

Jos havaittava antigeeni on läsnä tutkittavassa ruumiinnesteessä, tapahtuu spesifinen antigeeni-vasta-ainereaktio ns. Lukitus ja avain -periaatteen mukaisesti. Laboratorion henkilökunta voi syöttää näytemateriaalin levyille joko manuaalisesti pipeteillä tai täysin automaattisesti. Nykyaikaisissa lääketieteellisissä laboratoriolaitoksissa ELISA-diagnostiikan suorittamiseen käytetään vain täysin automatisoituja järjestelmiä.

Koulutetun henkilöstön, lääketieteellisen ja teknisen laboratorion avustajien on kuitenkin valvottava näitä. Ns. Sisäinen ja ulkoinen laadunvalvonta ovat myös laboratorion henkilöstön vastuulla, laboratoriolääketieteen, infektioepidemiologian ja mikrobiologian alaisella lääketieteen henkilöstöllä. Ensimmäisen yrityksen jälkeen, ts. Sen jälkeen kun materiaali on pipetoitu levyille, näytteen spesifiset antigeenit, jos niitä on, ovat jo sitoutuneet muovilevyn vasta-aineisiin.

Tätä seuraa pesusykli fysiologisella suolaliuoksella hajottavien tekijöiden, kuten ei-toivottujen antigeenien tai proteiinien, poistamiseksi erästä. Tämä vaihe on erittäin tärkeä väärien positiivisten reaktioiden välttämiseksi. Laboratorion väärin tulkitsemalla väitetysti positiivisella tuloksella voi tietyissä olosuhteissa olla kuolettavia seurauksia potilaalle. Tutkimuksen toisessa vaiheessa lisätään toinen vasta-aine, joka on kytketty entsyymiin. Tämä leimattu vasta-aine sitoutuu myös antigeeniin.

Kolmannessa ja viimeisessä vaiheessa lisätään erityinen väriaine määrätyssä määrässä, joka jäljelle jääneiden entsyymijäännösten avulla hajoaa suuressa tai pienemmässä määrin. Vain se entsyymi voidaan hajottaa, jota ei ole aikaisemmin sitoutunut antigeeniin yhdessä vasta-aineen kanssa. Vapaa entsyymi pystyy pilkkomaan lisätyn väriaineen. Jaetun väriaineen tarkka määrä voidaan määrittää lisälääketieteellisellä laboratoriomenetelmällä, ns. Fotometrialla. Tämä mahdollistaa tarkan päätelmän tekemisen siitä, onko antigeeniä näytteessä ja kuinka paljon.

ELISA-testiä ei käytetä vain alkuperäisessä diagnoosissa tai epäiltyjen diagnoosien todentamiseksi tietyissä sairauksissa ja kliinisissä kuvissa, vaan myös niiden etenemisen seuraamiseksi. Jos testin antigeenipitoisuus laskee hoidon aikana, terapiaa pidetään onnistuneena.

Löydät lääkkeesi täältä

➔ Lääkkeet puolustus- ja immuunijärjestelmän vahvistamiseksi

Riskit, sivuvaikutukset ja vaarat

ELISA-testi on erityisen informatiivinen havaitsemalla antigeenisiä rakenteita kehon nesteissä. Koe antaa niin sanotun kvalitatiivisen, mutta myös puolikvantitatiivisen ja kvantitatiivisen lausunnon tiettyjen antigeenien oletetusta esiintymisestä kehon nesteissä.

Koko verta ei voida käyttää tutkimukseen, vain veren seerumia. Siksi suoraa testiä potilaalle, esimerkiksi sormenpäiden kapillaariverestä, ei siksi, kuten joihinkin muihin serologisiin kokeisiin, voida toistaiseksi tehdä. Ihmislääketieteessä ELISA-testiä käytetään ensisijaisesti antigeenien havaitsemiseen bakteeri-, virus- tai sieni-infektioissa. Lisäksi kaikki hepatiitti-serologian positiiviset tulokset tarkistetaan uudelleen vakiona ELISA-testillä.

Tietyt hormonit, kuten raskaushormoni HCG, voidaan myös määrittää ELISA-testillä. Jos raskauden aikana ilmenee tiettyjä komplikaatioita, tarkka tieto raskaushormonin pitoisuudesta veressä on erittäin hyödyllinen diagnostisesti ja terapeuttisesti. Toinen indikaation alue testille on ns. Paraproteiinien havaitseminen virtsassa, koska niitä esiintyy esimerkiksi erilaisissa kasvainsairauksissa, kuten multippelissä myeloomassa.

ELISA-testi suoritetaan edelleen monissa laboratoriolaitoksissa nykyään, mutta asiantuntijat pitävät sitä vanhentuneena. Entsyymisidottu immuunireaktio ELISA-testissä on korvattu yhä enemmän viime vuosina radioaktiivisesti leimattuilla vasta-aineilla, jotka tarjoavat vielä parempia kvantitatiivisia tuloksia. Nämä testit tunnetaan myös nimellä RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. ELISA: n erityisiä lisäkehityksiä ovat kevyet kemialliset menetelmät, kuten luminesenssi tai fluoresenssi.