FISH-testi

Niistä FISH-testi on mikroskooppinen kromosomitesti rintasyövän, mahasyövän ja kroonisen lymfosyyttisen leukemian prenataaliseen ja karsinoomadiagnoosiin. Testillä, jonka tulos on saatavana 1-2 päivän kuluessa, voidaan ensisijaisesti havaita kromosomaalisia poikkeavuuksia, jotka voidaan jäljittää muuttuneeseen kromosomijoukkoon tietyissä kromosomeissa. Testi suoritetaan yksinomaan liitännäisenä tai alustavana testinä yksityiskohtaista kromosomianalyysiä varten, jonka tulokset ovat saatavissa vasta 2-3 viikkoa solujen poistamisen jälkeen.

Mikä on FISH-testi?

FISH-testi (Fluoresenssi in situ -hybridisaatio) mahdollistaa prenatalisessa diagnoosissa johtopäätösten tekemisen kromosomien muuttuneesta joukosta tietyille kromosomeille. FISH-testin suorittamiseksi vaaditaan vähintään 50 viljelemätöntä sikiön solua (amnionisolut), jotka otetaan amnioottisesta nesteestä (noin 2 - 3 ml). Vaihtoehtoinen menetelmä sopivien solujen saamiseksi on koorion villuksen näytteenotto, jossa solut otetaan napanuoran kiinnittymisalueelta biopsialla.

Erityinen menetelmä sallii kromosomien 13, 18, 21 sekä X- ja Y-kromosomien yksittäisten juosteiden eriyttämisen fluoresoivilla väreillä, niin että mahdollinen trisomia on havaittavissa, kun läsnä on kolme kromosomin kahden homologisen juosteen sijaan. . Maha- ja rintasyövässä FISH-testiä voidaan käyttää tarkistamaan, onko kasvaimella enemmän kuin kaksi kopiota HER2 / neu-geenistä (ihmisen epidermaalinen kasvutekijäreseptori), jolla on vaikutuksia kemoterapian tyyppiin. Kroonisen lymfosyyttisen leukemian sairauksissa tiettyjen geenien yleisimmät kromosomimuutokset voidaan määrittää useilla FISH-testianalyyseillä luuytimestä ja ääreisverestä otetuissa näytteissä, mikä vaikuttaa myös terapiaan.

Toiminta, vaikutus ja tavoitteet

Eristettyjen soluydinten kromosomit tehdään jakamaan kaksoiskelirakenne erityisellä kemiallisella käsittelyllä tai lämmön vaikutuksella, ja kromosomispesifiset DNA-koettimet, joilla on vastaava komplementaarinen DNA-sekvenssi, yhdistävät “heidän” spesifisiin kromosomeihinsa. DNA-koettimet on merkitty eri värillisillä fluoresoivilla väreillä, jotta merkityt kromosomit voidaan erottaa toisistaan ​​erityisellä ohjelmistolla ja laskea automatisoidussa prosessissa.

Tunnetaan z. B. Trisomiat, joissa yhdellä kromosomilla on kaksi kromosomin juosteen sijasta kolmea. Tunnetaan myös ns. Monosomioita, joissa X-kromosomissa on vain yksi juoste ja kaikissa kromosomeissa kolme tai neljä homologista juostetta. Tärkeimmät kromosomimuutokset, jotka voidaan havaita FISH-testillä prenataalidiagnoosissa, ovat Ullrich Turnerin oireyhtymä (monosomia X), kolmois X oireyhtymä (trisomia tai polysomia X), Klinefelterin oireyhtymä, jossa kaikissa tai osalla poikkien somaattisia soluja on ylimääräinen X-kromosomi (XXY XY: n sijasta), Downin oireyhtymä (trisomia 21), Edwardsin oireyhtymä (trisomia 18) ja Patau-oireyhtymä (trisomia 13).

Monosomy X, jossa tytöillä on vain yksi X-kromosomi, on yleensä tappava, mikä tarkoittaa, että noin 98%: lla tapauksista se johtaa keskenmenoon raskauden kolmen ensimmäisen kuukauden aikana. Jos syntyy muutenkin, tyttöjen elinajanodote on normaali, älykkyysaste on keskimääräinen, mutta kärsivät usein useista sisäelinten epämuodostumista ja ovat useimmiten steriilejä. Kolminkertainen X-oireyhtymä kromosomisarjalla XXX) vaikuttaa vain tytöihin. Normaali raskaus ja synnytys on mahdollista.

Useimmiten pitkät naiset, joilla on kolminkertainen X-kromosomi, voivat elää normaalisti ja niissä ei yleensä esiinny fyysisiä poikkeavuuksia, vaikkakin oppimisvaikeudet eivät ole harvinaisia ​​ja hienojen motoristen taitojen ongelmia esiintyy. Klinefelterin oireyhtymälle, jolla voi olla vaikutusta vain poikiin ja miehiin, on tunnusomaista ylimääräinen X-kromosomi, joka on läsnä kaikissa kehon soluissa tai vain osittain. Fyysiset ominaisuudet ovat keskimääräistä korkeampia epätavallisen pitkillä käsillä ja jaloilla. Klinefelterin oireyhtymä johtaa yleensä vähentyneeseen kiveen kasvuun vähentämällä testosteronin vapautumista.

Down-oireyhtymä, synonyymiksi trisomialle 21, liittyy useimmiten tiettyihin fyysisiin ominaisuuksiin ja kognitiivisiin rajoituksiin. Trisomian 21 muotoja on erilaisia, joista nk. Vapaa trisomia 21 on hallitseva noin 95%: lla tapauksista. Trisomy 18 (Edwardsin oireyhtymä) aiheuttaa keskenmenon useimmissa tapauksissa, liittyy useisiin fyysisiin ominaisuuksiin ja elinajanodote on vain muutama päivä. Trisomialle 13 (Pätau-oireyhtymä) on ominaista myös suuri joukko fyysisiä piirteitä ja ei-toivottuja kehityksiä, jotka usein johtavat keskenmenoihin tai kuolleiden syntymään. Lasten elinajanodote kauden aikana on vain muutama vuosi.

Prenataalisen FISH-testin tarkoituksena on havaita tunnetut kromosomaaliset poikkeavuudet varhaisessa vaiheessa, jotta vanhemmille tarjotaan vaihtoehto lailliselle abortille lapsen synnyttämiseksi. Rinta- ja maksasyövässä karsinoomat voidaan tarkistaa lisääntyneestä HER2 / neu-geenimäärästä FISH-testillä. Positiivisessa tapauksessa kasvutekijäreseptoreiden muodostuminen lisääntyy, jotka reagoivat tiettyihin kemoterapioihin. FISH-testejä on saatavana myös kroonisen lymfosyyttisen leukemian (CLL) spesifisten geneettisten poikkeavuuksien tunnistamiseksi, mikä parantaa tehokkaiden kemoterapia-aineiden koostumusta.

Riskit, sivuvaikutukset ja vaarat

Itse FISH-testiin ei liity mitään riskejä tai vaaroja. Vain tutkittavien solujen uuttamiseen tutkimalla biopsia tai otettamalla näytteenotto amnionivedestä (amnioenteesi) liittyy pieni infektioriski niiden invasiivisen luonteen vuoksi. Erikoisuus on, että FISH-testi voi paljastaa joitain spesifisiä kromosomivirheitä, mutta ei voida taata, että negatiivisissa tuloksissa ei ole kromosomipoikkeavuuksia, koska kaikkia poikkeavuuksia ei voida havaita FISH-testillä. Jos testitulos on positiivinen, tulee suorittaa lisädiagnostiikkaohjeita tuloksen vahvistamiseksi tai hylkäämiseksi virheellisenä.